技術(shù)文章
在生命科學(xué)研究與生物醫(yī)藥開發(fā)領(lǐng)域,分子互作儀發(fā)揮著至關(guān)重要的作用,它能夠精準(zhǔn)檢測(cè)分子間的相互作用,為科研工作提供關(guān)鍵數(shù)據(jù)支持。然而,面對(duì)市場(chǎng)上琳瑯滿目的分子互作儀產(chǎn)品,該如何選擇適合自己研究需求的儀器呢?本文將圍繞分子互作儀的類型、應(yīng)用場(chǎng)景以及價(jià)格等方面,為您提供全面的選購(gòu)指南。
一、分子互作儀的核心技術(shù)與類型
(一)表面等離子共振(SPR)分子互作儀
工作原理:SPR 技術(shù)基于光學(xué)原理,當(dāng)入射光以特定角度照射到金屬表面時(shí),會(huì)激發(fā)表面等離子體共振現(xiàn)象。此時(shí),若分子在金屬表面發(fā)生結(jié)合或解離,會(huì)導(dǎo)致金屬表面附近介質(zhì)的折射率發(fā)生變化,進(jìn)而引起共振角度的改變。儀器通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)共振角度的變化,就能獲取分子間相互作用的信息,如結(jié)合速率(ka)、解離速率(kd)以及親和力常數(shù)(KD)等。
應(yīng)用場(chǎng)景:廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)領(lǐng)域,可用于篩選針對(duì)特定藥靶的藥物分子,評(píng)估藥物與靶點(diǎn)的結(jié)合特性,助力早期藥物發(fā)現(xiàn);在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中,能夠篩選與已知分子結(jié)合的活性分子,深入了解蛋白質(zhì)之間的相互作用網(wǎng)絡(luò);還可用于檢測(cè)復(fù)雜標(biāo)本中目標(biāo)分子的活性濃度,為疾病診斷和治療提供依據(jù)。例如,在抗體藥物研發(fā)中,利用 SPR 分子互作儀可準(zhǔn)確測(cè)定抗體與抗原的親和力,篩選出高親和力的抗體克隆,提高抗體藥物的研發(fā)效率。
優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):具有高靈敏度和高精度,能夠檢測(cè)低濃度樣本中的分子相互作用;無(wú)需對(duì)樣品進(jìn)行標(biāo)記,避免了標(biāo)記過(guò)程對(duì)分子活性和相互作用的干擾;可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)分子結(jié)合過(guò)程,提供豐富的動(dòng)力學(xué)信息。以 Cytiva 的 Biacore 8k 為例,其檢測(cè)通道數(shù)≥ 16,進(jìn)樣針數(shù)≥ 8,最小進(jìn)樣體積不高于 1μ L,基線噪聲 ≤0.02RU(RMS),能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)生物分子相互作用的精準(zhǔn)檢測(cè)。
(二)生物層干涉(BLI)分子互作儀
工作原理:BLI 技術(shù)通過(guò)光學(xué)干涉信號(hào)來(lái)監(jiān)測(cè)生物分子層厚度的變化。當(dāng)生物分子在傳感器表面發(fā)生結(jié)合或解離時(shí),會(huì)導(dǎo)致生物分子層厚度改變,進(jìn)而引起干涉條紋的移動(dòng)。儀器通過(guò)檢測(cè)干涉條紋的移動(dòng)情況,實(shí)現(xiàn)對(duì)分子相互作用的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),獲取分子結(jié)合和解離的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
應(yīng)用場(chǎng)景:在抗體親和力成熟研究中,可快速篩選出親和力更高的抗體變體;適用于大規(guī)模的蛋白 - 蛋白互作研究,能夠同時(shí)處理多個(gè)樣本,提高研究效率;在病毒受體結(jié)合分析方面也有重要應(yīng)用,有助于深入了解病毒感染機(jī)制。例如,國(guó)產(chǎn)的( BLI)分子互作儀采用 BLI 技術(shù),支持高通量分析,可同時(shí)分析多達(dá) 8 個(gè)獨(dú)立的平行相互反應(yīng),自動(dòng)運(yùn)行 96 個(gè)樣本,廣泛應(yīng)用于各類分子的互作分析、發(fā)病機(jī)制研究等領(lǐng)域。
優(yōu)勢(shì)特點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,樣本消耗量低,非常適合高通量篩選;能夠直接檢測(cè)混合物,如血清、細(xì)胞裂解液等,無(wú)需復(fù)雜的樣本前處理;設(shè)備維護(hù)相對(duì)簡(jiǎn)單,成本較低。
二、細(xì)分領(lǐng)域?qū)S梅肿踊プ鲀x
(一)抗體親和力檢測(cè)系統(tǒng)
功能:專門針對(duì)抗體親和力檢測(cè)進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),能夠精確測(cè)定抗體與抗原之間的親和力常數(shù),評(píng)估抗體的質(zhì)量和性能。該系統(tǒng)通常具備高靈敏度的檢測(cè)模塊和專業(yè)的數(shù)據(jù)分析軟件,可對(duì)抗體親和力進(jìn)行準(zhǔn)確量化,并提供詳細(xì)的動(dòng)力學(xué)信息,如結(jié)合速率、解離速率等。
應(yīng)用意義:在抗體藥物研發(fā)過(guò)程中,抗體親和力是影響藥物療效的關(guān)鍵因素之一。通過(guò)使用抗體親和力檢測(cè)系統(tǒng),能夠快速篩選出高親和力的抗體,提高抗體藥物的研發(fā)成功率,縮短研發(fā)周期。同時(shí),在抗體生產(chǎn)過(guò)程中,該系統(tǒng)可用于質(zhì)量控制,確保每一批次抗體產(chǎn)品的親和力符合標(biāo)準(zhǔn)。
(二)藥企專用 SPR 儀
藥企需求定制:藥企在藥物研發(fā)過(guò)程中,對(duì)分子互作儀的需求具有特殊性。藥企專用 SPR 儀通常針對(duì)藥物研發(fā)流程進(jìn)行優(yōu)化,具備更高的檢測(cè)通量、更精準(zhǔn)的定量分析能力以及良好的兼容性,能夠與藥企現(xiàn)有的研發(fā)平臺(tái)和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)無(wú)縫對(duì)接。例如,某些藥企專用 SPR 儀可一次性處理大量藥物候選分子樣本,快速篩選出具有潛力的藥物分子,同時(shí)保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性,滿足藥企大規(guī)模、高效率的藥物研發(fā)需求。
(三)核酸蛋白互作儀
檢測(cè)重點(diǎn):主要聚焦于核酸與蛋白質(zhì)之間相互作用的檢測(cè)。通過(guò)特定的技術(shù)手段,能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)核酸與蛋白質(zhì)在結(jié)合和解離過(guò)程中的各種參數(shù)變化,如結(jié)合親和力、結(jié)合位點(diǎn)以及動(dòng)力學(xué)過(guò)程等。例如,利用熒光標(biāo)記或無(wú)標(biāo)記技術(shù),觀察核酸與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)熒光信號(hào)的改變或表面等離子共振信號(hào)的變化,從而深入研究核酸 - 蛋白復(fù)合物的形成機(jī)制和功能。
科研與應(yīng)用價(jià)值:在基因調(diào)控研究中,核酸與蛋白質(zhì)的相互作用對(duì)基因的表達(dá)和調(diào)控起著關(guān)鍵作用。核酸蛋白互作儀能夠幫助科研人員深入了解這一過(guò)程,為揭示基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)、開發(fā)新型基因治療藥物提供重要的數(shù)據(jù)支持。在生物制藥領(lǐng)域,該儀器可用于評(píng)估藥物對(duì)核酸 - 蛋白相互作用的影響,篩選出具有潛在治療效果的藥物分子。
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